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种子生活力测定

鉴定播种材料潜在发芽能力的工作。发芽测定是鉴定种子发芽能力的直接可靠的方法,但测试时间较长,尤其对于一些需要较长时间预冷冻的休眠的种子,甚至需要几个月的时间。为此,由于时间、设备等条件的限制,在不能进行发芽测定的场合,可采用快速的生活力测定技术。发芽测定结束时,对尚未发芽的种子,有时也需要采用某种方法测定其生活力。测定结果,以具有生活力(即潜在发芽能力)的种子数占供试种子总数的百分比表示。

鉴定播种材料潜在发芽能力的工作。发芽测定是鉴定种子发芽能力的直接可靠的方法,但测试时间较长,尤其对于一些需要较长时间预冷冻的休眠的种子,甚至需要几个月的时间。为此,由于时间、设备等条件的限制,在不能进行发芽测定的场合,可采用快速的生活力测定技术。发芽测定结束时,对尚未发芽的种子,有时也需要采用某种方法测定其生活力。测定结果,以具有生活力(即潜在发芽能力)的种子数占供试种子总数的百分比表示。测定种子生活力的方法很多,国际种子检验协会(ISTA)的检验规程和中国国家标准已经认可,能用于部分树种的有四唑法。ISTA建议试用的有离体胚培养法。苏联和东欧国家多用靛蓝法。日本习用硒盐法。国际上正在发展的有过氧化氢法和X射线衬比摄影法。四唑法、靛蓝法和都又常统称为染色法。染色法所需时间比发芽测定短得多,但逐粒剖切种子的工作相当烦琐,也无法取得异状发芽、平均发芽时间之类的重要信息。

四唑法

常用的是氯化三苯基四氮唑,简称四唑,为白色粉末,分子式为C19H15N4Cl。也可以使用溴化三苯基四氮唑。测定时将已经吸水的供试种子投入浓度为0.1~1%的四唑溶液中,在25~30℃下避光浸渍。时间长短取决于树种、溶液浓度和环境温度。略略切破种皮可以缩短时间。四唑溶液无色。浸入活细胞的四唑被脱氢酶产生的氢还原成红色、不溶于水、稳定而不扩散的三苯基甲。死细胞则不呈现这种红色。逐粒剖开种子观察,根据死亡组织在胚和胚乳上的部位及其范围大小判断有无生活力。

靛蓝法

靛蓝又称酸性靛蓝或靛蓝胭脂红。一种苯胺染料,蓝色结晶状粉末,分子式为C16H8N2O2(SO32Na2。靛蓝能透过死细胞使其染色,但不能透过活细胞。靛蓝法仅仅制取供试种子的胚投入靛蓝溶液,根据胚是否染色以及染色的部位和范围大小判断种子有无生活力。取胚时胚受伤的地方最容易染色,要善于辨别。常用的溶液浓度为0.05~0.1%。处理时间一般为2~4小时。靛蓝法不考虑胚的状况,是个重大缺陷。

碘化钾法

有些树种的胚在发芽的第二个阶段(见)生成淀粉。种子吸水并置于发芽环境中两三天后取出胚,投入碘液(每100毫升水中先放入碘化钾1.3克,溶解后再加入0.3克结晶碘)。20~30分钟后取出,根据淀粉的着色反应判断种子生活力。

硒盐法

种子纵向切开后放在培养皿的滤纸上,加入2%的硒酸氢钠(NaHSeO3)溶液。经一定时间(一般至少20小时)后,有生活力的胚由于具有呼吸作用而被溶液的还原盐染成红色。

离体胚培养法

将从种子中取出的胚放在适宜的环境中培养,一段时间后有生活力的依然坚实而保持原色,或转呈绿色,或略有生长;无生活力的则颜色转深,失去光泽,或孳生霉菌。离体胚培养法比发芽测定法快,比染色法容易鉴别,但取胚费工,操作时也容易伤胚。

过氧化氢法

过氧化氢(H2O2)有促进种子发芽的作用。按照一定程序和方法在1%的过氧化氢溶液中浸泡过的种子,一段时间后胚根即有可见的生长。以胚根长度达到或超过5毫米的为生活力“强”,不及5毫米的为生活力“弱”,不见胚根生长的为无生活力的种子或空粒种子。过氧化氢法比发芽测定所需时间短,可以实测胚根长度作为判别标准,因此比染色法容易鉴别,但速度不及染色法。

X射线衬比摄影法

用于检查饱满种子、发育不良的种子、空粒种子、畸形种子、虫害种子和机械损伤种子。这种方法已经得到ISTA认可,同意在一定范围内使用。充分成熟而新鲜的欧洲松和挪威云杉种子,已能根据胚和胚乳发育的程度判断其潜在发芽能力。60年代开始出现的衬比技术显著提高了X射线摄影法的测定能力。已经证明对某些树种有效的衬比剂有氯化钡、三氯甲烷等。衬比剂通过水溶液渗入种子中坏死的组织,但不能渗入活组织,使穿过种子达到摄影胶片上的X射线密度出现明显差别。在经过显影冲洗的胶片上,根据坏死组织所在的部位和范围大小,可以判断种子的生活力。