制造病毒类生物制品的主要工艺。病毒是专一性寄生微生物，它本身缺乏为增殖所需完整的酶系统，不能单独进行物质代谢，必须依靠宿主细胞提供原料、能量和场所，所以它只能在易感动物和易感细胞内以复制方式进行增殖。

动物要来自健康畜群，并适合所要接种病毒的要求，接种前经过健康观察和检疫。常用的有小鼠、家兔或猪、羊、牛、马等。接种方法有脑内接种、皮下接种、静脉接种及腹腔接种。待动物发病后，根据不同病毒，采取含毒组织或器官病料，供生产用。

鸡胚是一种良好的活细胞组织，用鸡胚培养病毒，已广泛用于病毒分离、鉴定、抗原的制备及疫苗生产。一般选用9～10日龄鸡胚培养病毒。常用的接种方法有绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔及卵黄囊四种。接种后在38～39℃孵育，根据不同病毒，决定病毒收获时间及采取制苗用含毒组织。如制造鸡新城疫Ⅱ系及F系活疫苗时，接种10日龄鸡胚，培养96～120小时后收获鸡胚液供生产用。

利用细胞培养增殖病毒，是离体培养、分离、鉴定和大量生产病毒性生物制品的主要方法。使用的细胞有原代细胞、继代细胞、二倍体细胞株和传代细胞系四种（见病毒分离培养）。细胞培养方法主要有三种。

用原代单层细胞，在不停转动下培养，当细胞形成单层后，接毒继续培养，一次收获或更换营养液后继续培养，间隔一定时间收获病毒和换液，如此可连续4～6次或更多。

为了获得大容量的均匀生长的细胞悬液，需采用悬浮培养技术，即细胞在悬浮状态下生长。这种细胞必须是适宜悬浮培养的细胞株。用于悬浮培养的装置实际上是一个密闭的容器。随着科学技术和生产工艺的发展，这种装置由实验室规模发展到工业生产规模，由简单到复杂。早先用于细胞悬浮培养的装置只是一个容积为0.5升的带有侧臂和磁力搅拌器的玻璃瓶。目前已发展为非常先进、完美的工业型不锈钢培养罐，容积也可逐渐加大，直至单罐容积为3000升，并具有自动控制温度，变速搅拌装置。自动控制pH值、氧分压、二氧化碳分压等。罐上装有补液孔及取样孔，具有严密的防污染系统，并可通入高压蒸汽原地灭菌。一般采用通入空气/二氧化碳以调节营养液的pH值，以通入空气/氧气、氮气以控制溶解氧。先进的悬浮培养罐装配有一台电子计算机，用于分析并控制细胞培养的各种参数。

为了保证所有的细胞有足够的氧和养分，也为了避免细胞沉淀，细胞必须在搅拌下培养，其速度根据搅拌器的结构和挡板的大小而定，一般为30～300转/分，以能使细胞悬浮又不破坏细胞为原则。先进的工业规模的搅拌装置则包括一个搅拌器和一个振荡器。搅拌器是一个固定在转轴上的不锈钢盘。振荡器则是可形成垂直振荡的电磁装置。

悬浮培养在培养基中的血清含量超过2%时，则需加入消泡剂。在无血清培养的条件下，可以加入1～2%的羧甲基纤维素以提高培养基的粘度，利于细胞的悬浮。在细胞培养过程中需要定期采样，作细胞计数，并测定活细胞占细胞总数的比例，一般要求在90%以上，细胞浓度达到10⁶个/毫升时，进行收获，供制备疫苗。

细胞能在直径100毫微米的微球上粘附生长。这些微球可由聚乙烯、葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺或胶原制成。微载体培养的最大优点是单位体积培养基中的单层细胞具有最大的附着表面，而且可以按照悬浮培养方法进行培养。一个1升容积的微载体培养罐的可附着的表面积等于50个2升转瓶的表面积。用于微载体培养的培养罐的构造、性能、环境控制等与悬浮培养罐无差别。需缓慢搅拌以能使微球悬浮又不打碎细胞和微球为原则，一般为30～90转/分。加入的微球量占培养基最终容积的1/3。微球经过筛、缓冲溶液浸泡，滤干后，先悬浮于培养基中，然后加入培养罐，并将平面生长的细胞加到生长罐中。接种量为其他培养方法的3～5倍。微球上的细胞很难计数，可测定脱氧核糖核酸、蛋白质的含量或脱氢酶活性，以检查细胞的生长速度。收获细胞时，先以沉淀方法去除培养基，再以胰酶—乙二胺四乙酸将细胞从微球上洗脱下来，并以离心方法收集细胞。