在体外检测T细胞能否转化为淋巴母细胞并借以了解细胞免疫功能状态的方法。T细胞在体外培养时受非特异性有丝分裂原或特异性抗原刺激后,可转化为能分裂的淋巴母细胞。转化率的高低,可反映机体的细胞免疫状态和水平,故此试验已用于先天性细胞免疫缺陷病、急性或慢性淋巴细胞性白血病的诊断、肿瘤的疗效和预后的分析以及对患有结核病、布鲁氏菌病等传染病的动物细胞免疫功能的检测。
在体外检测T细胞能否转化为
淋巴母细胞并借以了解细胞免疫功能状态的方法。T细胞在体外培养时受非特异性有丝分裂原或特异性抗原刺激后,可转化为能分裂的淋巴母细胞。转化率的高低,可反映机体的细胞免疫状态和水平,故此试验已用于先天性细胞免疫缺陷病、急性或慢性淋巴细胞性白血病的诊断、肿瘤的疗效和预后的分析以及对患有结核病、布鲁氏菌病等传染病的动物细胞免疫功能的检测。
引起T细胞转化的刺激原很多,包括非特异性刺激原,如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(Con A)等有丝分裂原;特异性抗原,如结核菌素、鼻疽菌素、细菌类毒素(伪结核、破伤风)、组织抗原、肿瘤抗原和抗淋巴细胞血清等。特异性转化只能发生于带有相应抗原受体的T细胞克隆,因而其转化率要比非特异性转化率低得多,但却能反映机体对相应抗原的特异性细胞免疫水平。
常用试验方法有以下两种:
将待检淋巴细胞与有丝分裂原或抗原共同培养后,涂片染色,观察淋巴细胞的形态学变化,并按下列公式计算转化为母细胞的百分率。
淋巴细胞转化试验
转化细胞形态特征为细胞体积增大;核内染色质变疏松,出现1~3个核仁;胞浆丰富,胞浆内有小空泡,周边有尾足突起,但有些过渡型细胞只显示其中1~2个特点(图)。
淋巴细胞转化试验
3H-胸腺嘧啶核苷(3H-thymidine,3H-TdR)掺入法 利用T细胞被激活、发生转化的过程中,DNA的合成旺盛的原理,若在培养液中加入3H-TdR,则叮被作为合成DNA的原料摄入转化细胞中,最后测定细胞内放射性物质的掺入量(以脉冲数表示),即能客观反映淋巴细胞对刺激物的应答水平。
上述两种方法相比较,前者简单易行,不需特殊设备,但重复性和客观性较差;后者结果客观准确,重复性好,但需一定设备条件。
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