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淋巴细胞转化试验

在体外检测T细胞能否转化为淋巴母细胞并借以了解细胞免疫功能状态的方法。T细胞在体外培养时受非特异性有丝分裂原或特异性抗原刺激后,可转化为能分裂的淋巴母细胞。转化率的高低,可反映机体的细胞免疫状态和水平,故此试验已用于先天性细胞免疫缺陷病、急性或慢性淋巴细胞性白血病的诊断、肿瘤的疗效和预后的分析以及对患有结核病、布鲁氏菌病等传染病的动物细胞免疫功能的检测。

在体外检测T细胞能否转化为

淋巴母细胞并借以了解细胞免疫功能状态的方法。T细胞在体外培养时受非特异性有丝分裂原或特异性抗原刺激后,可转化为能分裂的淋巴母细胞。转化率的高低,可反映机体的细胞免疫状态和水平,故此试验已用于先天性细胞免疫缺陷病、急性或慢性淋巴细胞性白血病的诊断、肿瘤的疗效和预后的分析以及对患有结核病布鲁氏菌病传染病的动物细胞免疫功能的检测。

引起T细胞转化的刺激原很多,包括非特异性刺激原,如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(Con A)等有丝分裂原;特异性抗原,如结核菌素鼻疽菌素、细菌类毒素(伪结核、破伤风)、组织抗原、肿瘤抗原和抗淋巴细胞血清等。特异性转化只能发生于带有相应抗原受体的T细胞克隆,因而其转化率要比非特异性转化率低得多,但却能反映机体对相应抗原的特异性细胞免疫水平。

常用试验方法有以下两种:

形态学方法

将待检淋巴细胞与有丝分裂原或抗原共同培养后,涂片染色,观察淋巴细胞的形态学变化,并按下列公式计算转化为母细胞的百分率。

淋巴细胞转化试验

转化细胞形态特征为细胞体积增大;核内染色质变疏松,出现1~3个核仁;胞浆丰富,胞浆内有小空泡,周边有尾足突起,但有些过渡型细胞只显示其中1~2个特点(图)。

淋巴细胞转化试验

3H-胸腺嘧啶核苷(3H-thymidine,3H-TdR)掺入法 利用T细胞被激活、发生转化的过程中,DNA的合成旺盛的原理,若在培养液中加入3H-TdR,则叮被作为合成DNA的原料摄入转化细胞中,最后测定细胞内放射性物质的掺入量(以脉冲数表示),即能客观反映淋巴细胞对刺激物的应答水平。

上述两种方法相比较,前者简单易行,不需特殊设备,但重复性和客观性较差;后者结果客观准确,重复性好,但需一定设备条件。