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马传染性贫血琼脂扩散抗原

用于诊断马传染性贫血的生物制品。制备抗原选择驴胎皮肤、肺或胸腺细胞生长良好的培养瓶,接毒培养10天后收毒,向瓶中加入0.01摩尔/升PBS,冰箱冻融一次。将冻融的细胞悬液收集在一个容器,滴加2%醋酸液调整pH值至5.0后静置。透析离心,弃去上清液,沉淀物用0.01摩尔/升PBS稀释,加乙醚研磨,待乙醚挥发后进行抗原检定。

用于诊断马传染性贫血的生物制品。制备抗原选择驴胎皮肤、肺或胸腺细胞生长良好的培养瓶,接毒培养10天后收毒,向瓶中加入0.01摩尔/升PBS,冰箱冻融一次。将冻融的细胞悬液收集在一个容器,滴加2%醋酸液调整pH值至5.0后静置。透析离心,弃去上清液,沉淀物用0.01摩尔/升PBS稀释,加乙醚研磨,待乙醚挥发后进行抗原检定。抗原检定时用含16单位标准阳性血清马待检抗原各作倍倍稀释进行方阵试验,若抗原某最高稀释度能与原液至16倍稀释的标准阳性血清产生明显阳性反应,此抗原稀释度为合格使用抗原。将检定合格抗原按1%量加牛血清白蛋白冻干,即为白色粉末冻干抗原。

阳性参照血清系采集人工发病或自然发病的马传贫病马的血清,经56℃30分钟灭活后,将效价调至16单位,冻干而成。

使用时,用0.01摩尔/升PBS分别将抗原及阳性参照血清稀释,在用0.01摩尔/升PBS制备的1%琼脂板上,抗原滴加中心孔,阳性参照血清滴加外周2、4、6孔,被检血清滴加1、3、5孔。凡被检血清孔与抗原孔之间出现沉淀线或是与被检血清孔相邻的阳性参照血清孔与抗原孔间的沉淀线向抗原孔弯曲,则被检血清列为阳性。抗原与阳性参照血清有效保存期,在4℃条件下为1年,在-20~-40℃条件下为2年。