用理化方法将适宜的酶结合于抗体上，以揭示特异性抗体或抗原的存在的生物制品。常用的酶有辣根过氧化酶或碱性磷酸酶。酶标记抗体技术是纳凯恩和皮尔斯（P.K.Nakane and C.R.Pierce）于1966～1967年建立的。酶标记抗体既保持抗体与抗原反应的特异性，又具有酶的催化活性，微量酶与底物相遇即可呈现明显的反应。利用酶标记抗体技术，抗体抗原相对应时，就会生成抗体—抗原—酶复合物。
用理化方法将适宜的酶结合于抗体上，以揭示特异性抗体或抗原的存在的生物制品。常用的酶有辣根过氧化酶或碱性磷酸酶。酶标记抗体技术是纳凯恩和皮尔斯（P.K.Nakane and C.R.Pierce）于1966～1967年建立的。酶标记抗体既保持抗体与抗原反应的特异性，又具有酶的催化活性，微量酶与底物相遇即可呈现明显的反应。利用酶标记抗体技术，抗体抗原相对应时，就会生成抗体—抗原—酶复合物。复合物与底物相遇后出现颜色反应，由颜色深浅程度和位置，可以测知被检物中抗原或抗体的相对量及存在位置。
酶标记抗体的制备：通过具有双功能的交联剂形成共价结合，将酶间接联结到抗体分子上，即为酶标记抗体。交联剂通常用戊二醛。标记方法有：①一步法。酶、抗体、戊二醛一起反应产生标记抗体；②二步法。将酶先与戊二醛反应，酶分子上游离氨基仅与戊二醛的一个醛基结合，形成酶—戊二醛结合物，洗去多余的戊二醛。戊二醛的另一个醛基与随后加入的抗体分子上的氨基结合，形成标记抗体。标记完成后，尚有不同程度的IgG和游离酶、酶聚合物、大分子量的IgG聚合物，需用饱和度硫酸铵或Sephadex Gzoo凝胶过滤法纯化。也可用过碘酸钠氧化碳水化合物形成醛基再与蛋白质氨基结合。标记的抗体用分光光度计测定抗体的IgG量和酶量，并计算克分子比值。用于细胞成分的定位和体液中生物成分的测定。
QQ空间
新浪微博
微信扫一扫
所有评论仅代表网友意见