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免疫沉淀

将沉淀反应、十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和放射自显影三者结合的一种免疫分析技术。可从大量不同抗原的混合物中鉴定一种抗原组成,常用于病毒蛋白的组分分析。方法是在病毒细胞的营养液中加入放射性同位素标记的氨基酸(常用的是35S甲硫氨酸),对病毒多肽进行内标记。在细胞培养物上清中加入抗病毒特异性血清,使形成抗原抗体结合物,再加入吸附有SPA或抗抗体的琼脂糖珠将抗原抗体结合物沉淀;洗脱琼脂糖珠上的抗原,用SDS-PAGE分离病毒多肽组成,再在X光片上进行放射自显影,即可根据显影后出现的条带进行鉴定。如应用保护性单克隆抗体(MAb),即可用以鉴定病毒的保护性抗原组分,亦可用于鉴定所获得的MAb是针对哪一种病毒组分的。此技术也可用于信使RNA(mRNA)体外翻译系统和基因工程,分别对翻译产物和基因表达产物进行检测。

将沉淀反应、十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和放射自显影三者结合的一种免疫分析技术。可从大量不同抗原的混合物中鉴定一种抗原组成,常用于病毒蛋白的组分分析。方法是在病毒细胞的营养液中加入放射性同位素标记的氨基酸(常用的是35S甲硫氨酸),对病毒多肽进行内标记。在细胞培养物上清中加入抗病毒特异性血清,使形成抗原抗体结合物,再加入吸附有SPA或抗抗体的琼脂糖珠将抗原抗体结合物沉淀;洗脱琼脂糖珠上的抗原,用SDS-PAGE分离病毒多肽组成,再在X光片上进行放射自显影,即可根据显影后出现的条带进行鉴定。如应用保护性单克隆抗体(MAb),即可用以鉴定病毒的保护性抗原组分,亦可用于鉴定所获得的MAb是针对哪一种病毒组分的。此技术也可用于信使RNA(mRNA)体外翻译系统和基因工程,分别对翻译产物和基因表达产物进行检测。