蛋白质凝胶电泳与免疫定位技术相结合的一项分析技术。又称western转印。最早由托平(H.Towbin)等所建立。蛋白质经十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,根据分子量而形成区带,然后通过转移电泳将凝胶上的蛋白质区带转印到硝酸纤维素膜上
蛋白质凝胶电泳与免疫定位技术相结合的一项分析技术。又称western转印。最早由托平(H.Towbin)等所建立。蛋白质经十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,根据分子量而形成区带,然后通过转移电泳将凝胶上的蛋白质区带转印到硝酸纤维素膜上,经含吐温20的硫酸缓冲盐水(PBST)洗除后,在同一缓冲液中处理过夜,继之用对应抗血清或单克隆抗体处理1~3小时,洗涤后用酶标抗抗体或酶标葡萄球菌A蛋白(SPA)作用,洗涤后加底物溶液显色(如为同位素标记抗抗体,可用放射自显影显色),即可根据纤维膜上出现的区带进行分析,并可与在同一凝胶上电泳的蛋白质标准品进行对比而计算出各组分的分子量。
该技术既具有凝脉电泳的高分辨力,又有固相免疫测定的敏感性,主要用于病毒多肽组分的分析。待测病毒样品需经浓缩提纯,然后在含2%SDS-尿素或2.5%SDS及2%二巯基乙醇的处理液中加热处理,使病毒亚单位上的多肽组分裂解分离,即可根据电泳转印后出现的区带位置,确定病毒结构多肽的组分和分子量。如同时应用单克隆抗体(MAb)处理,还可确定该MAb所识别的病毒多肽组分。
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