利用生物素和亲和素结合具有亲和力高、特异性强的特点而建立起来的一种免疫标记系统。生物素广泛分布在植物和动物组织中，以辅酶形式参与各种羧化酶反应，又称辅酶R或维生素H。亲和素亦称抗生物素，是由四个亚基组成并富含色氨酸的一种带糖基的碱性蛋白。生物素与亲和素结合的亲和力比抗原抗体结合要大1万倍，结合物十分稳定。
利用生物素和亲和素结合具有亲和力高、特异性强的特点而建立起来的一种免疫标记系统。生物素广泛分布在植物和动物组织中，以辅酶形式参与各种羧化酶反应，又称辅酶R或维生素H。亲和素亦称抗生物素，是由四个亚基组成并富含色氨酸的一种带糖基的碱性蛋白。生物素与亲和素结合的亲和力比抗原抗体结合要大1万倍，结合物十分稳定。生物素和亲和素能在温和条件下与抗体、抗原、酶共价结合，并不影响各自的生物活性，因此在免疫化学领域内得到了广泛应用。
有ABC、BA和BAB法三种。①ABC法：先制备亲和素—生物素—过氧物酶结合物（avidin-biotin-peroxidase complex，CAB）和生物素标记的抗体（或抗原），即可用于酶联免疫测定（ABC-ELISA）和免疫酶组化染色。其程序是：抗体包被，加待测抗原，经生物素抗体作用，再用ABC处理，底物显色。组化染色时直接加生物素标记抗体和ABC即可。②BA法：制备生物素标记抗体和酶标记亲和素，反应程序的前3步同ABC法，然后用酶标记亲和素处理，最后显色。③BAB法：制备生物素标记抗体和酶标记生物素，反应程序前3步同ABC法，然后加亲和素搭桥，再加酶标记生物素，最后显色。
标本片经生物素标记抗体处理后，再加用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的亲和素染色，可显著提高常规荧光抗体法的灵敏度和特异性。
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