临诊意义:乳酸脱氢酶存在于肝脏、心肌、骨骼肌、肾脏等部位。心肌损伤时LDH总活力增高,LDH1明显升高;肾损伤时LDH总活力增高,LDH2升高;肝和骨骼肌损伤时LDH总活力明显增高
测定血清酶类活力的变化,诊断疾病的一类检验方法。血清酶分两大类,一类是特异性酶,存在于血浆(血清)中,由肝脏生成后释放入血浆;另一类是非特异性酶,在血浆中没有生理功能。非特异性酶又分为两种:①分泌酶。分泌快排泄也快,平时血浆中含量较低,一旦排泄途径被阻或分泌增高,血浆中的含量才会升高;②细胞酶。细胞中含量较高,如细胞受到损害而破损,则血浆中含量上升。酶在血浆中的含量变化,可作为诊断的一项依据。有的酶存在于几个器官中,必须测其同功酶才有诊断意义,如乳酶脱氢酶等。兽医临诊的一个特殊问题,就是家畜种类不同,同一种酶的临诊价值各异,如谷丙转氨酶对犬、猫的肝病诊断意义甚大,但对马、牛的敏感性极差。供作兽医临诊常用的血清酶测定有:转氨酶(见肝功能试验)、肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶同功酶、谷胱甘肽过氧化物酶等。
常用肌酸显色法。肌酸磷酸激酶被镁离子激活,此酶含有巯基,含巯基化合物可保护这种酶。因此,在该反应系统中加入镁和半胱氨酸,反应的产物为肌酸,肌酸与α-萘酚及双乙酰结合成红色化合物,红色的深浅与肌酸含量成正比,代入计算公式求得酶的含量。单位定义:1毫升血清在37℃时作用1分钟形成1微克分子的肌酸为一个单位。临诊意义:此酶对心肌、骨骼肌的损害及肌肉营养不良的诊断有特异性,对幼驹、犊牛、羔羊及仔猪更为灵敏,其生物半衰期仅为4~6小时。故必须及时测定,如患部持续受到损害,酶的活力也随之维持在高水平,可为观察病情和判断预后提供依据。
催化相同反应而性质不同的酶称同功酶。其中最早用于临诊的是乳酸脱氢酶。当某一器官或组织受到损害时,细胞中的酶被释放而进入血浆,测定血清同功酶活力,即可反映组织器官的病变。目前常用的测定方法为醋酸纤维薄膜电泳法。血清在一定条件下经电泳后,即可获得LDH1、LDH2、LDH3、LDH4、LDH5五种同功酶的区带。临诊意义:乳酸脱氢酶存在于肝脏、心肌、骨骼肌、肾脏等部位。心肌损伤时LDH总活力增高,LDH1明显升高;肾损伤时LDH总活力增高,LDH2升高;肝和骨骼肌损伤时LDH总活力明显增高,LDH3升高。
血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测定 GSH-PX可特异地催化还原型谷胱甘肽(或还原型辅酶Ⅱ-NADPH)与过氧化物的氧化还原反应。
血清酶类检验
在一定条件下可直接测定底物GSH的减少,经扣除非酶反应所引起的底物减少部分后,反应酶活力。底物GSH浓度测定是采用5,5-二硫对二硝基苯甲酸(DTNB)显色,按分光比色法进行。可用过氧化氢测出组织依硒型酶的活力,用异丙基过氧化氢(cumeme hydropexide)能测出全酶的总活性,两者之差即为非依硒型酶活性。临诊意义:血液中GSH-PX活性与血硒水平呈正相关,为幼畜(禽)硒缺乏症的重要诊断指标。
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