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胚胎品质检查

评价着床前胚胎发育的潜力的技术。为在移植后获得高妊娠率和正常仔畜对胚胎进行的一系列品质检查和评定十分必要。常用的评定方法有形态学评定、胚胎短期培养和荧光检查等方法。形态学评定法在显微镜下观察胚胎的形态是否正常,以判定胚胎进一步发育的潜力。

评价着床前胚胎发育的潜力的技术。为在移植后获得高妊娠率和正常仔畜对胚胎进行的一系列品质检查和评定十分必要。常用的评定方法有形态学评定、胚胎短期培养和荧光检查等方法。

形态学评定法

在显微镜下观察胚胎的形态是否正常,以判定胚胎进一步发育的潜力。形态学评定为正常的胚胎应该是:细胞发育阶段正常,卵裂球大小均匀,细胞透明度良好,细胞质均匀、无明显大颗粒,细胞团紧凑、不萎缩、不松散,早期胚胎的卵裂球界限清晰。这种方法的优点是快速、简便、经济,而且对胚胎无损伤,结果也比较可靠,是常用的一种方法。其缺点是在一定程度上受操作者实际经验的影响,主观成分较大,要求操作者具有较丰富的经验。

培养法

胚胎品质可通过体内或体外培养的方法进行检查。体内培养,即将取到的胚胎移到其他动物的输卵管或子宫内,经一段时间后取出观察其发育情况,从而判定胚胎质量。这种方法对胚胎损伤小,培养后的胚胎进一步发育力几乎不受影响;但需要中间受体,操作较麻烦,而且胚胎在从中间受体生殖道中回收时易于丢失。体外培养,即将胚胎置于一定环境条件下,经过一段时间后观察发育情况。这种方法比较客观,培养后的死活胚胎可一目了然,但方法本身对胚胎发育影响较大,可在一定程度上干扰判断的准确性。

荧光染色法

可用几种不同的荧光素进行染色,如二乙酰荧光素(fluorescein diacet tate,FDA)或4,6-二脒基,2-苯基吲哚(diamidino-2-phenylindole,DAPI)等。由于死、活细胞对荧光染料的反应不同,可以根据染色后胚胎是否着色而判断其死活。这种方法的优点是比较客观,死活细胞判断有一定依据,缺点是方法复杂,要求配备荧光显微镜,而且染色及照射时间过长,对胚胎活力有一定影响。