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妊娠诊断

用以判断母畜是否妊娠的一种繁殖技术。目的在于能及早组织未妊母畜再度配种,淘汰屡配不孕个体,提高畜群繁殖效率;并根据妊娠阶段以及所怀胎儿数目分别确定母畜营养水平,采取最佳饲养管理方案;有助于生产和经营管理计划的制定与实施。生产实践中

用以判断母畜是否妊娠的一种繁殖技术。目的在于能及早组织未妊母畜再度配种,淘汰屡配不孕个体,提高畜群繁殖效率;并根据妊娠阶段以及所怀胎儿数目分别确定母畜营养水平,采取最佳饲养管理方案;有助于生产和经营管理计划的制定与实施。生产实践中,早期妊娠诊断具有特殊的重要意义。妊娠诊断方法有以下几种。

日常观察法

通常由饲养员结合日常饲养管理和发情观察(或试情)进行,根据母畜的行为和体况变化大致可以判断某一个体是否已经妊娠,到妊娠中后期一般可以作出相当准确的判定。

正常情况下,未妊母畜将按照一定的周期间隔重复出现发情。已配种母畜通过发情观察或试情,到时不重复发情的个体,其中大多数已经妊娠。根据配种后第一周期不重复发情估测妊娠的准确率约为70%~80%。误判妊娠的原因主要是:配后未妊但进入生理或病理性乏情状态;出现隐性发情,未能观察出来;胚胎早期死亡等。误判未妊的主要原因是,少数个体妊娠后仍可能出现不规律的发情征状(多见于马属动物)。

根据行为和体况的改变也可粗略判断是否妊娠。妊娠母畜往往表现食欲增强、营养状况改善、被毛光亮、行动迟缓、性格温驯,结合未再出现发情,即可作出已经妊娠的判断。到妊娠后期,腹围逐渐增大,向一侧突出(牛、羊、马、驴)或下垂(猪),在突出部位偶尔可见胎动;乳房也随之发育、膨大,头胎母畜乳房的变化尤为明显。

临床诊断方法

通常由兽医师、畜牧师或经专门训练的技术人员在现场条件下实施诊断。

阴道检查法

借助阴道开张器扩张阴道进行视诊,大家畜亦可施行触诊。妊娠母畜的阴道粘膜苍白,粘液灰暗、量少、干涩,插入器械或手臂时有阻滞感;子宫颈阴道部收缩、变硬;子宫颈管紧闭,为浓稠、黄色粘液栓所堵塞;子宫颈的位置因妊娠期的进展而逐渐前移。此法自配后一个周期即可施行。但早期征状极易与间情期尤其是乏情期相混淆,造成误诊。如参照行为和体况,则可提高诊断准确率。此法多用于牛、羊、马和驴。

直肠检查法

术者手戴长臂薄膜手套,通过肛门插入直肠,隔着肠壁对生殖器官施行触诊。根据子宫和卵巢的形态、质地、体积和位置,孕体的特征,子宫动脉的特异搏动,反刍类子叶胎盘的出现和体积等特征综合进行判断。牛的直肠检查通常在配种后两个月左右进行,经验丰富者可提早在配后30~35天检查。此时,孕角尚未增大,但缺乏收缩力,有轻微波动感,细致触摸,可感觉到直径1~2厘米的羊膜囊;卵巢上有发育良好的黄体。60天时,孕角增大,有明显波动,无收缩力。熟练者可以精确判别尿膜—绒毛膜的存在,以资区分子宫积脓等病理状态。妊娠40~50天起,可以触摸到漂浮在胎液中的早期胎儿。90~100天起,可以摸到子叶(胎盘)。但在5~7个月之间,由于子宫下沉腹底,胎儿和子叶均难以触及。3~4个月起,子宫中动脉开始出现妊娠所特有的搏动。妊娠中后期,主要根据子宫的位置和形态、胎儿的大小、子叶的体积、子宫动脉特异搏动的出现等征状进行综合判断。水牛和牦牛与此相似。马、驴可早在配后18~20天施术,此时,孕角由扁变圆,有明显弹性。继而孕角基部逐渐膨大,此处子宫壁变软,可以摸到球形至卵形孕体,17~21天时,直径为2.5~3厘米;40天时6~7厘米;60天为13厘米×9厘米;90天达23厘米×14厘米。随着妊娠期的进展和孕体的增长,子宫逐渐下沉。此后主要根据子宫的位置和形态、胎儿的大小、子宫中动脉和子宫其他动脉特异搏动的出现进行综合判断。子宫中动脉开始出现特异搏动是在妊娠4~5个月。活重在150千克以上的母猪也可施行直肠检查术。术者只能插入4指进行触诊。配后21天可以作出初步判断,30天以后方能确诊。主要判断依据是子宫中动脉的增粗和特异搏动的出现,其次是子宫颈位置和质地的变化。直肠检查法也适用于驼和鹿,其他畜种因体格小而无法进行此项操作。

直肠检查是一项准确可靠的临床诊断方法,对于牛、马等大家畜,不仅可以判断是否妊娠和妊娠阶段,而且能够确定胎儿数目,又不需要专门设备,但对技术水平有较高要求,术者需经专门训练并有丰富经验。此法为各国养牛场和大畜人工授精站所广泛采用,并作为验证其他诊断方法准确率的一种经典方法(见直肠检查)。

腹部触诊法

大家畜仅适用于妊娠后期,受检时需站立保定。牛在下腹部右侧,马、驴在左侧,反复用力推压和放松腹壁,使漂浮在胎液中的胎儿交替移位和复位,借助胎儿复位时对腹壁的撞击而感知胎儿的存在。小型牛、马和驴可自妊娠7~8个月后施术。大型品种肥胖个体很难奏效。此法也用于绵羊。受检母羊取坐姿保定,术者一手持续推压左下腹,另一手以手指交替推压和放松右侧腹壁,用以感知胚胎的撞击。于90~130天施术,准确率达到80%~95%。猪可自配后两个月检查,取侧卧姿势,两手相对轻压下腹两侧,前后往复滑动,以感知胎儿的存在。对于家兔,触诊则是一种最实用的方法。取俯卧姿态,一手掐住颈部皮肤加以保定,另一手隔着腹壁触摸胎儿,并注意分辨胎儿数目。一般自配后10~15天施术,准确率在90%以上。

X射线透视摄影法

利用X射线不能穿透骨组织的原理,根据有无胎儿骨骼系统的存在确定是否妊娠和胎儿数目。澳大利亚专门设计制造了一种便携式X光机,供农场巡回使用。每天可诊断母羊400~600只,2~3个月时,准确率为52%,3个月以上可达100%。

超声波探测法

用于家畜的妊娠诊断始于60年代末,发展极其迅速,已有4种类型产品得到应用。①多普勒超声波探测仪,应用最早、使用最广。运动物体反射声波信号时,反射波的频率因运动方向和速度而改变。这类仪器可发射某一频率的超声波,当被胎儿的运动部位(搏动的心脏和动脉、流动的血液)反射后,反射波的频率发生改变。仪器把改变频率的反射波转换为音频信号,一旦出现这一音频信号,说明已经探测到胎儿的运动部位,据此作出已经妊娠的判断。此法适用于各种家畜,但应用最广的是绵羊,其次是猪和奶牛。绵羊在配种后30天以上,判定妊娠的准确率为80%,60天后可达90%。但判定未妊的准确率较低。②A型超声波探测仪。利用超声波在不同组织中传播深度和反射波振幅的改变,确定是否有胎液存在,从而作出妊娠与否的判断。这类仪器也是把超声回波转换为音频信号以供识别。猪在配种后30~90天时,判定妊娠的准确率可达90%以上,而判定空怀的准确率也较低。③多普勒/A型双功能超声波探测仪。一般先启动A型功能,用以探寻子宫角位置,再启用多普勒功能探测胎儿心搏。这种设计可以大大提高诊断效果。④B型超声波图象仪。利用超声波断层扫描成象技术,显示子宫和孕体的模拟图象。猪和绵羊可在配种后20天左右作出准确结论。

实验室诊断方法

利用母畜少量体液或者某种组织样本在实验中用专门方法检测其中与妊娠有关的某些激素的浓度变化,特异物质的出现、理化性质的改变、某些组织的形态学特征等进行妊娠诊断的系列方法。

孕酮分析

未孕母畜,黄体于下次发情前退化,血液孕酮浓度随之降至基础水平;如果妊娠,周期黄体将转变为妊娠黄体,血液孕酮浓度维持高水平,乳汁孕酮浓度虽数倍于血液孕酮,但两者之间存在严格的平行关系。这一发现使孕酮分析法发展成为一种实用化的妊娠诊断技术,多用于乳牛。此法鉴定空怀的准确率很高,几乎达到100%;判定妊娠的准确率略低,约为85%。商业化应用中,在农场采集配种后20~40天之间母牛的乳样,将乳汁送交专门实验室,用放射免疫方法分析乳样孕酮浓度,再将分析结果反馈给农场。还有一种基于酶联免疫原理的诊断药盒,用目测比色法判定,完全在农场条件下进行。

雌酮分析

空怀母猪,血液硫酸雌酮的浓度很低;妊娠25~30天之间,孕体开始产生大量雌酮,母体血液硫酸雌酮浓度短暂升高,而于35天后下降。在配种后25~30天之间采集血样,分析血浆硫酸雌酮浓度,用以判定妊娠或空怀。此法判定妊娠的准确率达到100%,判定空怀的准确率在90%左右,妊娠80~90天以后,胎盘产生大量雌酮,此后用雌酮分析法判定妊娠或空怀,准确率都可达到100%。母猪尿液硫酸雌酮浓度更高,且平行于血液硫酸雌酮。根据尿液硫酸雌酮浓度进行妊娠诊断和简易采集尿样的方法也已建立起来。母牛妊娠早期,雌酮主要来源于妊娠黄体。在妊娠40~60天时,乳汁硫酸雌酮升高达到可测定水平。乳汁硫酸雌酮浓度也可作为牛妊娠诊断的依据。母马妊娠中后期,尿液中含有大量雌酮和马烯雌酮。早期工作中采用化学定性分析法根据该物质存在与否,判定妊娠或空怀。

阴道上皮活组织检查

阴道深部粘膜层上皮细胞的层数和形态受循环雌激素水平的调节。发情前期和发情期,母猪阴道上皮细胞的层数增加,最多时由20层细胞构成;发情后期和间情期,细胞层数渐减,到周期11~12天时,仅为3~4层,到间情末期只保留1~2层。在妊娠18~25天之间,上皮细胞着色很深,平等排列为两层。在此期间,诊断准确率最高,判定妊娠为95%以上,判定空怀准确率稍低。此后,由于雌酮浓度升高,上皮细胞层数将相应增加,从而失去诊断价值。具体做法是,用一特制长柄组织钳,插入阴道深部,切取小块阴道粘膜,用10%福尔马林溶液固定,切片以苏木精—曙红染色,在400倍光学显微镜下观察、判断。此法也适用于绵羊,空怀时,阴道上皮由12层鳞状和多角形细胞组成;妊娠后,减至5层,表层为立方形、深层为矮柱形细胞。配种后40天,判定妊娠的准确率可达90%以上,80天后达到100%,判定空怀的准确率为80%。对于绵羊,检测时间可不受限制,操作方法与猪相同。

免疫学试验

妊娠后,孕体产生某些特异性物质(激素类、酶类等)。这些物质多具有抗原性,用以免疫异种动物,即可获得特异抗血清。免疫学妊娠诊断就是某种特异抗血清检测动物体液中是否存在特异抗原,据此判别妊娠与否。

在妊娠一定时期内,母牛血清中出现大量透明质酸酶,母马血清中出现高浓度胎盘促性腺激素孕马血清促性腺激素),多种哺乳类动物受精后不久血清中出现微量早孕因子(一种糖蛋白),所有这些特异物质都可以用免疫学方法检测出来,作为妊娠诊断的依据。这类方法因为都要采集血样,所以并未实际应用。

粘液试验

母畜妊娠后,子宫颈粘液的物理和化学性质都有所改变。据此建立了几种简易的实验性诊断方法,如粘液—蒸馏水煮沸法,粘液—10%氢氧化钠溶液煮沸法,粘液比重法,粘液结晶观察法等。这类方法准确性较差,没有得到广泛应用。