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化学诱变育种

5-溴去氧尿核苷(BUDR)等;叠氮化物主要是叠氮化钠;抗生素有平阳雷素、重氮丝氨酸、丝裂霉素C等。常用的化学诱变剂的主要特性见表1。 表1 几种常用的化学诱变剂 诱变机理关于化学诱变的作用机制目前仍不十分清楚。烷化剂的利用比较广泛,此类物质有一个或多个活跃的烷基,能够转移到电子密度较高的分子中,置换其他分子的氢原子,使碱基改变。造成DNA碱基缺失及修补。

利用化学诱变剂,诱发植物遗传性状发生变异,从中选择对人类有用的个体,进而育成新品种或获得新种质的育种方法。

诱变剂的种类

化学诱变剂的种类繁多,诱变效果好的有10多种。按其化学结构分有烷化剂、核酸碱基类似物、叠氮化物、抗生素等。烷化剂中主要有甲基磺酸乙酯(EMS)、乙烯亚胺(EI)、亚硝基乙基脲烷(NEU)、亚硝基甲基脲烷(NMU)、硫酸二乙酯(DES)等;核酸碱基类似物有5-溴尿嘧啶(BU)、5-溴去氧尿核苷(BUDR)等;叠氮化物主要是叠氮化钠;抗生素有平阳雷素、重氮丝氨酸、丝裂霉素C等。常用的化学诱变剂的主要特性见表1。

表1 几种常用的化学诱变剂

诱变机理

关于化学诱变的作用机制目前仍不十分清楚。烷化剂的利用比较广泛,此类物质有一个或多个活跃的烷基,能够转移到电子密度较高的分子中,置换其他分子的氢原子,使碱基改变。造成DNA碱基缺失及修补。核酸碱基类似物中的碱基与DNA的碱基相类似,渗入DNA后,使DNA复制时发生配对上的错误。叠氮化钠是诱变率最高的一种诱变剂,对其作用机理尚不了解,当诱变溶液的pH值在3左右时,可能以HN3通过碱基替代方式起诱变作用,因此诱发的突变点较多。抗生素具有破坏DNA和核酸的能力,造成染色体断裂,进而产生变异。这些遗传物质结构上的改变,导致功能的改变,从而使有机体发生遗传变异。

化学诱变处理通常在溶液中进行。处理种子前需有预浸过程,诱变作用发生在细胞所处的发育时期一般比辐射处理的晚;化学诱变剂有较明显的迟效作用和化学活性基团的再诱变作用、而且有较高的特异性。

处理方法

处理对象最多的是种子,其次是植株及其器官组织和离体培养物。处理种子时,先将种子在水中浸泡一定时间,或将干种子直接浸在一定浓度的诱变剂溶液中一定时间,经水洗后立即播种。或将种子重新干燥后贮藏,以待播种。处理植株时,简单的方法是在茎上切一浅口,用蘸有诱变剂的脱脂棉塞入植物体,也可用适量的诱变剂溶液注射或涂抹于需要处理的器官或组织上。花粉处理,可在密闭系统内将花粉铺成单层,用诱变剂蒸气熏蒸。有些禾谷类作物可在开花前剪下穗子,插入诱变剂溶液中,使其吸收一定量的诱变剂后,再用其授粉。处理培养物时,培养前用诱变剂处理,然后培养。也可在培养基中加入一定量的诱变剂进行培养。

常用诱变剂的浓度范围见表2,处理时间以使受处理的器官组织完成水合作用,达到诱变剂所需的水解半衰期(见表3)和能被诱变剂浸透为度。其剂量为诱变剂的浓度乘处理时间。

表2 主要诱变剂浓度范围

表3 不同温度下EMS和DES的水解半衰期

由于化学诱变剂大都是潜在的致癌物质,使用时必须有相应的防护条件和措施。