测定精液的物理、化学性状和生理学指标，以评价和预测其受精能力的技术。通常依据以下多项性状测定结果作出综合评定。

猪、兔和马属动物正常精液外观呈淡乳白色或浅灰白色，半透明。牛、羊和家禽精液外观为浓厚乳白色，不透明，有的牛精液为淡黄色。若呈褐色、红色、绿色或有异常气味，可能混入了尿液、血液或脓液，不能使用。混入大量异物或粪尿（家禽精液）的精液也不能使用。

采得射出精液的容量。用有定量刻度的集精容器或移液管测量，注意量前需除去猪、马、驴和兔精液中的胶状物。各种家畜的精液量有很大差异，不同个体或同一个体的各次射精量也有很大不同。猪的正常精液量范围为150～500毫升，马为30～300毫升，驴为36～120毫升，牛为2～10毫升，羊为0.5～2毫升，家禽为0.3～1毫升。超出正常范围，应参考其他测定指标和该公畜以往的精液量记录决定取舍。精液量与精子密度共同构成种公畜的精子产量。

每毫升精液中的精子数。测定精子密度的基准方法是用血细胞计数器进行计数测定。牛、羊等家畜精液的精子密度较大，可用红细胞吸管，马、猪等家畜精液的精子密度较小，可用白细胞吸管。具体操作与白细胞计数相同。

精液冷冻站等生产单位多采用比色法测定精子密度。用光电比色计或分光光度计测定一系列已知密度精液的光密度，制出标准曲线，未知样品的光密度测值与标准曲线对照查出精子密度。专用的精子密度比色计，可把标准密度的透光度和精子密度的计算过程，及其他精液处理所需参数存入电子计算机，经计算机处理后，直接显示所测样品的精子密度读数，并打印出精子密度、稀释液需用量和可分装的细管数。比色法只能测定原精密度，不能测含卵黄或乳类等有色稀释液的稀释精液密度。

其他方法还有：①微细胞计数器计数法。借助测定血细胞的电子计数器直接测定精液样品中的精子数。测定前需经血细胞计数器标校准参数。②估测法。取一滴精液压片后在显微镜下观察，根据精子间空隙的大小评定“密”、“中”或“稀”，分别代表大致的精子密度。③比浊法。用硫酸钡溶液制成一系列与已知密度精液的浊度相同的标准管，将未知样品与其目测对比。测定速度快，但标准管透明度易变而影响比浊结果的准确。④细胞容量法。将精液样品置于血红素标准管中定时定速离心，测定沉淀精子的体积，与已知密度的标准体积相对比，求出未知精液样品的密度。

精液中的精子密度依家畜品种、个体、采精季节或采精频率而异，羊的精子密度范围为20亿～50亿/毫升，牛为3亿～20亿/毫升，马为0.3亿～8亿/毫升，驴为1亿～5亿/毫升，猪为0.25亿～3亿/毫升，狗为1亿～9亿/毫升，兔为1亿～2亿/毫升。家禽精子密度变化也很大，约为每毫升含精子10亿～80亿。精液的精子密度过低，以致每输精剂量中的有效精子数达不到输精要求时，不能使用。在研究精子代谢活动，或测定精液中的酶活性等生化指标时，必须确切测定精子密度。

精子的活动能力。活精子的运动能力可以是摆动、旋转、曲线前进或直线前进，前进的速度有快有慢。精子运动速度的快慢主要取决于精子本身能量代谢的水平。这种代谢活动受温度影响很大，温度适宜速度快，温度偏低速度慢。因此一般定在38℃进行评定。

估测法。是应用最为广泛的评定精子活力的方法。取一滴精液压片后，在100～400倍显微镜下观察评定前进运动精子的百分数，英、美用%表示，前苏联则用0.1至0.9表示，可用箱具罩住显微镜保温；也可用具有控温载物台的显微镜进行定温评定；采用相差显微镜更能分层观察整体精子，提高评定的准确性。在显微镜上配备摄象和显象系统，可供多人同时观察，减少评定主观性。估测法评定速度快，方便实用。再配备计算机和图象分析技术，能在数秒钟内不仅测定出样品的精子活力、运动速度和平均运动速度，还能同时测出精子密度，最后打印出这些数据和精子运动速度分布图。

其他评定精子活动能力的方法还有：①多次曝光摄影法。将精液作高倍稀释，使各视野只含10～20个精子，观察时作显微摄影，曝光时在光源与聚光器之间设一多次曝光装置，使活精子在底片上留下虚线状运动轨迹，而死精子在原位虽经多次曝光仍为一亮点。随机统计50～100个精子（5次重复），计算活精子百分率，依据精子运动轨迹的形状（直线、曲线或圆圈）评定精子运动状态和计算直线前进运动精子百分率，根据精子运动的距离和曝光时间测定精子运动速度。②伊红—苯胺黑活体染色法。取一滴精液样品与伊红—苯胺黑染料迅速混匀后立即抹片，经自然干燥在1000倍显微镜下观察，活精子因染料不能进入而呈白色，死精子染成粉红色。每样品至少统计500个精子，计算活精子百分率。还可用刚果红、苯胺蓝、台盼蓝或快绿等染料作死活精子染色。也可用血细胞计数器两次计数法，即第一次只记死精子数，每二次计总精子数，以二次之差的活精子数计算活率，因测定中费时费工或有局限性而未能广泛应用。③目测精子运动速度。取一小滴精液作压片后，在显微镜下用秒表测定精子从测微尺的一个刻度游到另一刻度的时间，每次压片测定25个精子，共测4次，取其平均数。

精子活力持续的时间，包括人为改变精子生活环境时的精子存活能力。常用以下测定内容：①存活时间。测定在特定温度下，精子持续存活的最长时间。将待测样品置38℃恒温水浴、室温（15～25℃）或0～5℃保存，每隔一定时间观察一次活率，直至样品中精子全部死亡（或活率可忽略不计），统计经历的小时数。②生存指数。在观察存活时间时，设计的综合评定存活时间和精子活率的指标，将相邻两次活率的平均数与其间隔小时数乘积∑〔（上次活力＋本次活力）÷2×两次评活力间隔的小时数〕。③精子抗力试验。测定精子对异常环境的耐受力。如测定精子耐受1%氯化钠溶液稀释量的能力，取0.2毫升原精液用1%氯化钠溶液按固定程度逐级扩大稀释，计算全部精子失去前进运动能力时所用1%氯化钠溶液的总量，以抗力系数表示。根据抗力系数，在按精子密度和抗力系数编制的专用表上，查出输精用精液量。牛和羊精液的抗力系数通常为1万～3万，猪精液为2万～5万。还可用0.1N硫酸测定精子对酸碱度的抗力，或使精子骤然降温，测定精子的抗冷击能力。

测定精液中畸形精子的百分率和顶体完整精子的百分率。①精子畸形率。取一小滴经等渗溶液稀释的精液样品迅速做薄抹片，经自然风干，用刚果红、结晶紫、石碳酸复红、苏木精伊红或姬姆萨染色后，在1000倍显微镜下观察。也可用含0.35M氯化钾的2.9%柠檬酸钠溶液与待测精液作1∶1混合，使精子失去活力，再作压片，用微分干涉相差显微镜（简称DIC显微镜）直接观察。每样品随机统计500个精子，记录畸形精子，包括大头、小头、瘤状头、梨形头、双头、无尾、双尾、单卷尾、多重卷尾、主段断尾、颈部倒折及具原生质滴等。一般认为畸形精子率低于20%为合格精液。②完整顶体率。一般采用姬姆萨染色或DIC显微镜直接观察。将精液样品作抹片，风干，经固定后，水洗，干燥，用姬姆萨染液染色，再经水洗干燥后在1000倍显微镜下观察，每样品观察200～400个精子，分别按统一标准（顶体完整、轻微或严重膨胀、部分脱落和完全脱落）统计顶体完整和不完整精子的百分数。应用DIC显微镜直接观察时，可直接或经戊二醛—二甲砷酸钠固定后压片观察。判断的主要标准是，能看到顶体顶脊的精子评为顶体完整的精子；看不到顶脊，则评为顶体不完整。完整顶体率能保持35%以上的精液可用于人工授精。

通过测定精子生存环境的生物物理和生物化学指标，来反映精子的潜在受精能力。①精液pH值。一般用pH试纸测定原精pH值，有特殊需要时可用各型pH计测定。马、驴和猪精液的pH值约为7.5，其他家畜约为7.0。稀释精液的pH值随稀释液和保存时间而变动。精子在偏碱性环境存活时间较长，在偏酸性环境存活时间较短。②渗透压。反映精液中各种粒子的浓度。可用贝克曼温度计测定其冰点，用冰点下降度（Δt℃）表示，家畜精液的冰点下降度一般为-0.57～-0.64℃。也可直接用气压式渗透压计测定，以毫摩尔/千克表示。牛、羊、猪、兔或鸡精液的渗透压约为300毫摩尔/千克，偏离范围过大时不利精子存活，但冷冻精液稀释液的渗透压可高达1000毫摩尔/千克以上。③耗氧量。表示精子代谢活动的强弱，精子活力和密度密切相关，可用瓦氏呼吸器进行测定，以每亿精子每小时消耗氧的微升数表示，测值常受精液中其他物质的干扰。④果糖利用率。精子把精液样品中果糖分解为乳酸能力的强弱，以果糖酵解指数，即10亿精子在37℃无氧条件下，每小时被利用果糖毫克数为计算指标。正常牛和绵羊精液的果糖酵解指数为1.4～2.0，猪和马精液的指数为0.2～1.0。测定值受精子密度及其活力的影响。⑤美蓝（methy-lene blue）退色试验。是利用美蓝获得氢离子后变成无色的特性测定精液品质的一种方法。取0.2毫升原精用卵黄柠檬酸钠溶液作1∶4稀释，置于10×75毫米试管中，加入0.05%美蓝溶液0.1毫升，混匀后加约1.5厘米厚的石蜡油层覆盖，置46.5℃水浴，根据美蓝退色的终点时间评定精液品质，以退色时间短为优，退色愈快，耗氧愈快，表示活力愈强。死精子或不含精子的精液都不能使美蓝退色。测定结果受精子密度影响。⑥酶的测定。如精液中透明质酸酶、谷氨酸草酸乙酰转氨酶（GOT）、乳酸脱氢酶（LDH）及磷酸酶等。⑦精液中腺苷三磷酸（ATP）的测定。

根据去透明带的仓鼠卵接受精子没有种间特异性的特点，取一定数量的去透明带仓鼠卵，与一定数量待测精液样品在CO₂培养箱中定时培养后，计算被精子穿透卵的百分数及卵内精子平均数。受精能力强的样品穿透卵的百分数高，卵内平均精子数也多。还可根据精子在发情牛宫颈粘液中的穿透距离而评定精液样品，在相同的温度和时间条件下，穿透的距离越大，反映精子的受精能力越强。

精液中病原菌依国家检疫法检验，含病原菌的精液不可使用。按常规细菌检查法测定精液中非病原菌数，即取一定量精液均匀铺在琼脂平面培养基上，经38℃恒温培养48小时后计数，统计每毫升精液中的细菌数，一般要求低于1000个。